微生物在自然界起着极其重要的作用，微生物的生命活动能力其世代时期较短，在传代过程中易发生变异甚至死亡，可能会造成优良菌种的丢失，所以说菌种保存是进行微生物育种的重要组成部分。

菌种的保存往往通过人工创造条件减少菌体生长代谢活动量，减少变异，一般通过保持培养基营养成分在最低水平，缺氧状态、干燥和低温，是菌种处于“休眠状态”。其中冻干工艺在微生物保存中占有极其重要的地位，但由于要求严格，需要一定设备，步骤复杂不易掌握。

真空冷冻干燥是利用升华的原理使物料脱水的一种干燥技术。物料经快速冻结后，在真空 (低于水的三相点压力)环境下加热。

真空冷冻干燥技术是将含水物料冷冻成固体，在低温低压条件下利用水的升华性能，使物料低温脱水而达到干燥的新型干燥手段。由于真空冷冻干燥技术在低温、低氧环境下进行，大多数生物反应停滞，且处理过程无液态水存在，水分以固体状态直接升华，使物料原有结构和形状得到最大程度保护，最终获得外观和内在品质兼备的优质干燥制品。目前，真空冷冻干燥技术已在许多领域得到了广泛的应用。

益生菌冻干工艺，包括如下步骤：

A、接种活化将酵母菌、粪链球菌、乳酸杆菌分别按8-10％的接种量接种，接入培养基分别为TY(Yeast Tryptone Agar)培养基、MRS培养基、MRS培养基；

B、发酵将接种后的菌种分别在罐内发酵，发酵温度为37-39℃，罐内压为0.3`～0.6公斤/平方厘米。所述的酵母菌为需氧发酵，粪链球菌和乳酸杆菌为无菌空气发酵；

C、离心将发酵后的制剂分别置入离心机在2000-2500fpm条件下通过离心获得菌泥；

D、包埋将获得的菌泥分别加入保护剂包埋菌种；

E、冷冻干燥，将菌种至于冻干机分别制成冻干粉；

F、将上述步骤获取的冻干粉混合。